Артефактите при подготовката на пробата могат значително да повлияят на точността и надеждността на резултатите от клетъчното изображение. Като водещ доставчик на системи за клетъчни изображения, ние разбираме предизвикателствата, пред които са изправени изследователите при справянето с тези артефакти. В тази публикация в блога ще проучим как нашите усъвършенствани системи за изображения на клетки се справят с артефакти при подготовката на пробите, като гарантират висококачествени и възпроизводими данни за изображения.
Разбиране на артефактите при подготовката на пробата
Подготовката на пробата е решаваща стъпка в клетъчното изобразяване, но може да въведе различни артефакти. Тези артефакти могат да бъдат класифицирани в различни типове, като механични артефакти, химически артефакти и биологични артефакти.
Механични артефакти често възникват по време на физическа манипулация на проби, като изстъргване на клетки или пипетиране. Например, когато клетките се изстъргват от съд за култура, някои клетки могат да бъдат повредени, което води до промени в тяхната морфология. Химическите артефакти могат да бъдат резултат от използването на фиксатори, багрила или буфери. Някои фиксатори могат да причинят свиване или подуване на клетките, променяйки нормалната им структура. Биологичните артефакти могат да се дължат на замърсяване, като бактериален или гъбичен растеж в пробата, което може да попречи на изобразяването на целевите клетки.
Възможностите на нашите системи за клетъчни изображения при работа с артефакти
Изображения с висока разделителна способност за откриване
НашитеИнтелигентна сканираща система Live Cellе оборудван с камери с висока резолюция и модерна оптика. Това позволява ясна визуализация на клетките на много фино ниво, което позволява на изследователите да откриват дори фини артефакти. Например, малки механични повреди на клетъчната мембрана могат лесно да бъдат идентифицирани при изображения с висока разделителна способност. Системата може да заснема детайлни изображения с висок контраст, което прави възможно разграничаването между нормалните клетки и тези, засегнати от артефакти.
Адаптивни алгоритми за изображения
Нашите системи за клетъчни изображения използват адаптивни алгоритми за изображения. Тези алгоритми могат да коригират параметрите на изображението в реално време въз основа на характеристиките на пробата. Ако в пробата има зони с различни нива на флуоресценция или абсорбция на светлина поради химически артефакти, системата може автоматично да оптимизира времето на експозиция, усилването и фокуса, за да получи възможно най-доброто изображение. Например, ако определена област от пробата е била преоцветена, алгоритъмът може да намали усилването в тази област, за да предотврати насищането и все пак да осигури ясен образ на клетъчната структура.
Мултимодални изображения за изчерпателен анализ
Ние предлагамеСистема за изображения на живи клеткикоито поддържат мултимодални изображения, включително светло поле, флуоресценция и фазово контрастно изображение. Използвайки различни режими на изобразяване, изследователите могат да получат по-изчерпателен поглед върху пробата и по-добре да идентифицират артефактите. Например изображенията в ярко поле могат да покажат цялостната морфология на клетките, докато флуоресцентните изображения могат да подчертаят специфични клетъчни компоненти. Ако има несъответствие между изображенията, получени от различни режими, това може да показва наличието на артефакт. Флуоресцентен сигнал, който не съответства на очакваното разпределение в изображението в светло поле, може да е знак за химически или биологичен артефакт.
Стратегии за минимизиране на артефактите по време на подготовката на пробата
Удобни за потребителя ръководства за работа с проби
Като доставчик на системи за клетъчни изображения, ние предоставяме на нашите клиенти подробни лесни за потребителя ръководства за работа с проби. Тези ръководства обхващат всяка стъпка от подготовката на пробата, от клетъчна култура до оцветяване и монтиране. Например, ние препоръчваме използването на нежни техники за пипетиране, за да се сведе до минимум механичното увреждане на клетките. Ние също така предоставяме информация за подходящия избор на фиксатори и багрила, като се вземат предвид вида на клетките и изискванията за изображения. Следвайки тези ръководства, изследователите могат да намалят вероятността от въвеждане на артефакти по време на подготовката на пробата.
В – Калибриране на системата и контрол на качеството
Нашите системи за клетъчни изображения се предлагат с функции за калибриране на системата и контрол на качеството. Преди да започнете експеримент с изображения, системата може да бъде калибрирана, за да осигури точни и последователни резултати от изображенията. Този процес на калибриране взема предвид фактори като подравняването на оптиката, чувствителността на камерата и равномерността на осветяването. Освен това системата може да извършва проверки за контрол на качеството на примерните изображения, маркирайки всички потенциални артефакти въз основа на предварително определени критерии. Ако дадено изображение показва признаци на значителни артефакти, системата може да подкани потребителя да подготви отново пробата или да коригира параметрите на изображението.
Казуси от практиката: Реални приложения
За да илюстрираме как нашите системи за клетъчни изображения се справят с артефактите при подготовката на пробата, нека разгледаме някои казуси от реалния свят.
Казус 1: Изобразяване на ракови клетки
В проект за изследване на рака изследователите са изучавали морфологията и поведението на раковите клетки. По време на подготовката на пробата те използваха обикновен фиксатор, който причини известно свиване на клетките. Когато изобразиха пробите с помощта на нашата Live Cell Intelligent Scanning System, изображението с висока разделителна способност им позволи да открият артефактите на свиване. След това адаптивните алгоритми за изобразяване коригират параметрите на изобразяване, за да подобрят видимостта на клетъчната структура въпреки свиването. Чрез сравняване на изображенията, получени с различни режими на изобразяване, изследователите успяха да потвърдят, че наблюдаваните промени се дължат на фиксиращите, а не на присъщите характеристики на раковите клетки.
Казус 2: Диференциация на стволови клетки
В изследване за диференциация на стволови клетки, пробите са оцветени с множество флуоресцентни багрила. Някои области от пробата показват неравномерно оцветяване, което може да е химически артефакт. Мултимодалните възможности за изобразяване на нашата Live Cell Imaging System позволиха на изследователите да получат изчерпателни изображения. Адаптивните алгоритми коригираха изображението, за да компенсират неравномерното оцветяване, а функциите за контрол на качеството идентифицираха зоните с потенциални артефакти. Това позволи на изследователите да се съсредоточат върху точно оцветените области за техния анализ на диференциацията на стволовите клетки.
Заключение
Артефактите при подготовката на пробите са често срещано предизвикателство при клетъчните изображения, но нашите усъвършенствани системи за клетъчни изображения предлагат ефективни решения. Чрез изображения с висока разделителна способност, адаптивни алгоритми за изображения, мултимодални изображения и вътрешно системно калибриране и контрол на качеството, ние помагаме на изследователите да преодолеят тези предизвикателства и да получат надеждни и висококачествени данни за изображения.
Ако се интересувате да научите повече за това как нашите системи за клетъчни изображения могат да ви помогнат да се справите с артефактите за подготовка на пробата във вашите изследвания, ви каним да се свържете с нас за консултация относно доставката. Нашият екип от експерти е готов да ви помогне при избора на правилната система за вашите специфични нужди и да ви предостави най-добрата подкрепа по време на вашите експерименти с изображения.
Референции
- Албъртс, Б., Джонсън, А., Луис, Дж., Раф, М., Робъртс, К. и Уолтър, П. (2002). Молекулярна биология на клетката. Гарландска наука.
- Паули, JB (2006). Наръчник по биологична конфокална микроскопия. Спрингър.
- Murphy, DB (2001). Основи на светлинната микроскопия и електронното изобразяване. Уайли - Лис.
